Fő különbség - Áramlási citometria vs FACS

A sejtelmélet összefüggésében a sejtek az összes élő szervezet alapvető szerkezeti és funkcionális egységei. A sejtek szétválogatása olyan módszer, amelyet a különféle sejtek fiziológiai és morfológiai tulajdonságai alapján történő elválasztására használnak. Ezek lehetnek intracelluláris vagy extracelluláris jellemzők. A DNS, az RNS és a fehérjék kölcsönhatását intracelluláris interaktív tulajdonságoknak, míg az alakot, méretet és a különböző felszíni fehérjéket extracelluláris tulajdonságoknak tekintjük. A mai tudományban a sejtek szortírozási módszerei elősegítették a biológiai vizsgálatokban végzett különféle vizsgálatokat, valamint az új alapelvek kialakítását az orvostudományi kutatások révén. A sejtek szétválogatását különféle módszertanokon végezzük, amelyek magukban foglalják mind primitív kevesebb felszereléssel, mind fejlett technológiai módszertant, kifinomult gépek felhasználásával. Az áramlási citometria, a fluoreszcens aktivált sejtek szortírozása (FACS), a mágneses sejtek szelekciója és az egysejtes szortírozás a fő módszerek. Az áramlási citometriát és a FACS-t úgy fejlesztették ki, hogy a sejteket optikai tulajdonságaik alapján megkülönböztessék. A FACS az áramlási citometria speciális típusa. Az áramlási citometria egy olyan módszer, amelyet heterogén sejtpopuláció elemzésekor használnak különböző sejtfelületi molekulák, méret és térfogat alapján, amely lehetővé teszi az egyes sejtek vizsgálatát. A FACS egy olyan folyamat, amelynek során a sejtek mintakeverékét fényszóródásuk és fluoreszcencia-jellemzőik alapján osztályozzuk két vagy több tartályba. Ez a legfontosabb különbség az áramlási citometria és a FACS között.

TARTALOMJEGYZÉK

1. Áttekintés és a legfontosabb különbség 2. Mi az áramlási citometria 3. Mi a FACS 4. Az áramlási citometria és a FACS hasonlóságai 5. Összehasonlítás egymással - Áramlási citometria vs. FACS táblázatos formában 6. Összegzés

Mi az áramlási citometria?

Az áramlási citometria olyan módszer, amelyet az intracelluláris molekulák és a sejtfelület expressziójának megvizsgálására és meghatározására, valamint különálló sejttípusok meghatározására és jellemzésére használunk. A sejtek térfogatának és méretének meghatározására, valamint az izolált alpopulációk tisztaságának értékelésére is felhasználják. Ez lehetővé teszi az egyes cellák többparaméteres kiértékelését nagyjából ugyanabban az időben. Az áramlási citometriát annak a fluoreszcencia-intenzitásnak a mérésére használják, amelyet a fluoreszcensen jelölt antitestek okoznak, amelyek segítenek azonosítani a kapcsolódó sejtekhez kötődő fehérjéket vagy ligandumokat.

Az áramlási citometria általában három alrendszert foglal magában. Ezek a fluidumok, az elektronika és az optika. Az áramlási citometriában öt fő komponens érhető el, amelyeket a sejtek szortírozásához használnak. Ezek egy áramlási cellát (folyadékáramot használnak, amely azokat továbbítja és a cellákat hozzáigazítja az optikai érzékelési folyamathoz), mérési rendszer (lehetnek különböző rendszerek, beleértve higany- és xenonlámpákat, nagy teljesítményű vízhűtésű vagy kis teljesítményű, léghűtéses vagy dióda lézerek), ADC; Analóg-digitális átalakító rendszer, erősítő rendszer és egy elemző számítógép. Az adatgyűjtés az a folyamat, amelynek során az adatokat adatgyűjtésre kerül a mintákból áramlási citométer segítségével. Ezt a folyamatot egy áramlási citométerhez csatlakoztatott számítógép közvetíti. A számítógépen található szoftver elemzi az áramlási citométerről a számítógéphez továbbított információkat. A szoftver képes az áramlási citométert szabályozó kísérlet paramétereinek beállítására is.

Mi az a FACS?

Az áramlási citometriával összefüggésben a fluoreszcenciával aktivált sejt-válogatás (FACS) egy olyan módszer, amelyet biológiai sejtek keverékének mintájának megkülönböztetésére és válogatására használnak. A sejteket két vagy több tartálytól elválasztjuk. A szortírozási módszer a cella fizikai tulajdonságain alapszik, amely magában foglalja a cella fényszóródását és fluoreszcens tulajdonságait. Ez egy fontos tudományos technika, amely felhasználható az egyes cellákból kibocsátott fluoreszcencia jelek megbízható mennyiségi és minőségi eredményeinek megszerzésére. A FACS során kezdetben a sejtek előzetesen előállított keveréke; egy szuszpenziót egy keskeny folyadékáram közepére irányítunk, amely gyorsan áramlik. A folyadék áramlását úgy tervezzük, hogy a szuszpenzióban lévő sejteket az egyes cellák átmérője alapján elválasztjuk. A szuszpenzió áramára rezgésmechanizmust alkalmaznak, amely egyes cseppek képződését eredményezi.

A rendszert kalibrálják annak érdekében, hogy egyetlen cseppet hozzon létre egy cellával. Közvetlenül a cseppek képződése előtt az áramlási szuszpenzió egy fluoreszcencia-mérő berendezés mentén mozog, amely kimutatja az egyes cellák fluoreszcencia-jellemzőit. A cseppek képződésének helyén egy elektromos töltőgyűrűt helyeznek el, amelyet a gyűrűhöz töltés indukál a fluoreszcencia intenzitásának mérése előtt. Miután a cseppek a szuszpenziós áramlástól képződtek, egy töltés csapdába esik a cseppekben, amelyek azután elektrosztatikus alakváltozási rendszerbe lépnek. A töltés szerint a rendszer a cseppeket különböző tartályokba irányítja. A díj alkalmazásának módja a FACS-ban alkalmazott különféle rendszerektől függ. A FACS-ben használt berendezés fluoreszcenciával aktivált sejt-szortírozóként ismert.

Mi a hasonlósága az áramlási citometria és a FACS között?


  • Az áramlási citometriát és a FACS-t úgy fejlesztették ki, hogy a sejteket optikai tulajdonságaik alapján megkülönböztessék.

Mi a különbség az áramlási citometria és a FACS között?

Összegzés - Áramlási citometria vs. FACS

A sejt az összes élő szervezet alapvető szerkezeti és funkcionális egysége. A sejtek szortírozása az a folyamat, amellyel a sejteket izolálják és különféle kategóriákba sorolják az intracelluláris és extracelluláris tulajdonságok alapján. Az áramlási citometria és a FACS két fontos módszer a sejtek szortírozásában. Mindkét eljárást úgy fejlesztették ki, hogy megkülönböztesse a sejteket optikai tulajdonságaik alapján. Az áramlási citometria egy olyan módszer, amelyet heterogén sejtpopuláció elemzésekor használnak különböző sejtfelületi molekulák, méret és térfogat alapján, amely lehetővé teszi az egyes sejtek vizsgálatát. A FACS egy olyan folyamat, amelynek során a sejtek mintakeverékét fényszóródásuk és fluoreszcencia-jellemzőik alapján osztályozzuk két vagy több tartályba. Ez a különbség az áramlási citometria és a FACS között.

Töltse le az Flow Cytometry vs FACS PDF verzióját

Letöltheti e cikk PDF verzióját, és offline célokra felhasználhatja, az idézet megjegyzésének megfelelően. Kérjük, töltse le itt a PDF verziót. Az eltérés az áramlási citometria és a FACS között

Referencia:

  1. Áramlásos citometria (FCM) / FACS Fluoreszcencia-aktivált sejtek szortírozása (FACS). Belépés 2017. szeptember 22-én. Itt elérhető: Ibrahim, Sherrif F. és Ger van den Engh. “Áramlásos citometria és cellaszortírozás.” SpringerLink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1970. január 1.. Elérve 2017. szeptember 22-én. Itt érhető el

Kép jóvoltából:


  1. 'Citométer' By Kierano - Saját munka, (CC BY 3.0) a Commons Wikimedia segítségével 'Fluoreszcencia-segédeszköz-osztályozás (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) In vitro modellrendszer kifejlesztése az Equus caballus kölcsönhatásának tanulmányozására IgE magas affinitású FcεRI receptorával (PhD értekezés), a Sheffieldi Egyetem (CC BY-SA 3.0) a Commons Wikimedia segítségével